Latar Belakang: Infeksi nosokomial merupakan salah satu masalah kesehatan yang berdampak buruk pada pasien dan tenaga kesehatan. Bakteri patogen dapat dengan mudah menyebar melalui tangan tenaga kesehatan sehingga diperlukan pencegahan dengan tindakan mencuci tangan. Tujuan: Untuk mengetahui tingkat pengetahuan serta perilaku perawat di RSUD Soreang tentang mencuci tangan sebagai pencegahan infeksi nosokomial. Metode: Metode penelitian menggunakan metode deskriptif observasional. Jumlah sampel yang didapatkan sebanyak 20 sampel. Data penelitian berupa lembar tilik (check-list) observasi mencuci tangan sesuai standar WHO dan kuesioner untuk perawat di ruang rawat inap anak RSUD Soreang. Metode analisis yang digunakan adalah univariat dan bivariat. Metode analisis bivariat menggunakan Fisher test. Hasil: Hasil statistik hubungan tingkat pengetahuan dengan sikap responden dan tingkat pengetahuan dengan persepsi terhadap perilaku mencuci tangan diketahui memiliki nilai p=0.53 (p>0.05). Hasil analisis tingkat pengetahuan dengan praktik mencuci tangan memiliki nilai p=1 (p>0.05) sehingga ketiga analisis menunjukkan bahwa tidak terdapat hubungan yang bermakna Kesimpulan: Pengetahuan dan perilaku perawat di RSUD Soreang baik. Tidak terdapat hubungan antara tingkat pengetahuan dengan sikap, persepsi dan praktik mencuci tangan perawat di RSUD Soreang. Hal tersebut dapat disebabkan oleh keterbatasan penelitian yaitu jumlah sampel yang sedikit.